關(guān)于人類精子庫(kù)，精子冷凍保存會(huì)影響精子質(zhì)量嗎？

人類精子庫(kù)（human sperm bank）是關(guān)于利用超低溫冷凍保存等技術(shù)，采集、人類檢測(cè)、精庫(kù)精冷精質(zhì)保存和外供人類精子用于治療不育癥、凍保提供生殖保險(xiǎn)，影響并進(jìn)行相關(guān)研究的關(guān)于機(jī)構(gòu)。“人類精子庫(kù)”概念的人類提出歷史久遠(yuǎn)。

四川省人類精子庫(kù)

精子庫(kù)的精庫(kù)精冷精質(zhì)歷史

1776年

意大利著名生物學(xué)Spallanzani發(fā)現(xiàn)冰雪凍存的精子經(jīng)復(fù)溫處理能有部分精子存活。

1886年

Mouteyazza發(fā)現(xiàn)在低于-15℃時(shí)人類精子能夠生存，凍保并首次提出了“精子庫(kù)”的影響概念。

1949年

Polge等發(fā)現(xiàn)甘油具有良好的關(guān)于細(xì)胞冷凍保護(hù)特性,使這一設(shè)想成為可能。

1954年

Bunge和Sherman報(bào)道采用保存于干冰中(-78℃)的人類人類精子解凍后人工授精獲得成功。

1963年

Sherman優(yōu)化了精液的精庫(kù)精冷精質(zhì)冷凍方法，將精液冷凍儲(chǔ)存于液氮(-196℃)獲得理想效果，凍保至此，影響人類精子庫(kù)技術(shù)平臺(tái)基本形成。

1973年

10年間全世界約有1000例用冷凍精液人工授精出生的嬰兒，人類精子庫(kù)已發(fā)展成為常規(guī)的臨床服務(wù)機(jī)構(gòu)。

1981年

原湖南醫(yī)學(xué)院（現(xiàn)中南大學(xué)）盧光琇等建立了我國(guó)第一家人類精子庫(kù)。

1986年

原國(guó)家計(jì)劃生育委員會(huì)科學(xué)技術(shù)研究所（現(xiàn)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)育生委員會(huì)科學(xué)技術(shù)研究所）陳振文承擔(dān)了國(guó)家計(jì)生委重點(diǎn)項(xiàng)目“人類精子超低溫冷凍保存技術(shù)的研究和人類精子庫(kù)的建立”，并在WHO的培訓(xùn)和資助下建立了人類精子庫(kù)，其目的在于開展生殖保險(xiǎn)，為輸精管絕育志愿者解除后顧之憂。此外，青島、山東、上海等地也相繼建立了人類精子庫(kù), 并將人類精子庫(kù)的精液用于供精人工授精。

2001年

原衛(wèi)生部（現(xiàn)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)）頒布《人類輔助生殖技術(shù)管理辦法》和《人類精子庫(kù)管理辦法》，同年5月14日以衛(wèi)科教發(fā)〔2001〕143號(hào)發(fā)布了《人類輔助生殖技術(shù)規(guī)范》、《人類精子庫(kù)基本標(biāo)準(zhǔn)》、《人類精子庫(kù)技術(shù)規(guī)范》和《實(shí)施人類輔助生殖技術(shù)的倫理原則》。

精子庫(kù)靠志愿者募集

精子冷凍保存

精子冷凍保存是人類精子庫(kù)的核心技術(shù)內(nèi)容。

成功的精子冷凍保存要求在解凍后保持精子結(jié)構(gòu)和功能的完整性。為了保證正常的體內(nèi)、體外受精能力，精子的細(xì)胞器必須在冷凍和解凍過程中得到保護(hù)，特別是頂體、鞭毛和中段等結(jié)構(gòu)。

然而，這些細(xì)胞器對(duì)冷凍損傷（例如滲透壓）的敏感性是不同的。有時(shí)候，當(dāng)精子活動(dòng)率得到很好保護(hù)時(shí)，或許頂體的完整性卻受到了嚴(yán)重的損傷。因此，設(shè)置理想的冷凍解凍流程在某種程度上是一門平衡的藝術(shù)。

目前待解決的問題：如何提高冷凍技術(shù)，進(jìn)一步減少冷凍對(duì)精子的損傷，提高精子冷凍復(fù)蘇率？

1、對(duì)精子活動(dòng)能力的影響

冷凍可導(dǎo)致精子運(yùn)動(dòng)能力受損，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，冷凍后精子的活動(dòng)率會(huì)下降。不同樣本、不同冷凍方法，其冷凍復(fù)蘇率不同。

Oberoi等(2014)證實(shí)正常精液冷凍解凍后，精子的活動(dòng)率會(huì)從86%下降到63%。Araki等(2015)采用微囊單精子冷凍，解凍后冷凍復(fù)蘇率在78%左右。Stein等(2015)采用冷凍環(huán)冷凍嚴(yán)重少弱精子癥精子（每環(huán)10~20個(gè)精子），93%的樣本在解凍后至少能找到一個(gè)活動(dòng)精子。Saeednia等(2015)采用正常精液精子進(jìn)行冷凍，解凍后的冷凍復(fù)蘇率為82%。

精子庫(kù)限制條款多而復(fù)雜

2、頂體損傷

冷凍可導(dǎo)致精子頂體的損傷，頂體損傷程度直接影響冷凍精子的受精能力。冷凍后部分精子會(huì)出現(xiàn)頂體腫脹及破損。頂體損傷主要發(fā)生于解凍時(shí)，嚴(yán)重時(shí)可致精子死亡。與新鮮精子相比，冷凍精子獲能及頂體反應(yīng)提前。

3、精子質(zhì)膜損傷

冷凍和解凍過程可導(dǎo)致精子質(zhì)膜受損，進(jìn)而損害精子的運(yùn)動(dòng)能力。膜損傷的程度可以通過測(cè)定細(xì)胞膜不飽和脂肪酸的脂類過氧化值(lipid peroxidation，LPO)確定。

4、DNA損傷

冷凍和解凍過程可引起精子DNA損傷。

Spano等(1999)使用吖啶橙對(duì)精子頭進(jìn)行DNA染色，發(fā)現(xiàn)冷凍后精子頭熒光強(qiáng)度下降，表明精子DNA的完整性受損。Chohan等(2004)進(jìn)一步證實(shí)上述結(jié)果，同時(shí)發(fā)現(xiàn)不同個(gè)體精子DNA在冷凍后的損傷程度不同，因個(gè)體差異，部分個(gè)體的精子DNA更易因冷凍受損。

有研究報(bào)道，當(dāng)DNA受損的精子超過30％時(shí)精子無法正常受精，因此，Chohan等(2004)建議在使用冷凍精液進(jìn)行人工授精前應(yīng)檢測(cè)精子DNA的損害程度。

人類精子庫(kù)同時(shí)面向健康人群和男性不育患者兩個(gè)群體，應(yīng)當(dāng)承擔(dān)男性生殖遺傳資源的保存、開發(fā)和利用的研究任務(wù)。